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雌激素試劑盒問題解析
更新時間:2018-06-15 點擊次數:1718次
  試劑的選擇,選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。加樣中可能遇到的問題,在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法好是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理。
 
  洗板時容易造成誤差,因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以好多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候,要先查看顯色劑本身的情況。終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒。
 
  雌激素試劑盒處理及要求,血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
 
  雌激素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)往預先包被(E)elisa檢測,雌激素捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(E)elisa檢測,雌激素呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)計算樣品濃度。

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